病毒DNA提取試劑盒

病毒DNA提取試劑盒是專門用于從血清(血漿)等液體樣品中提取病毒(如 HBV)DNA 的產(chǎn)品， 其原理是異硫氰酸胍/LiCl 溶液即能裂解病毒，又能沉淀 DNA。本產(chǎn)品靈敏度高， 穩(wěn)定性好，使用簡(jiǎn)單快捷，尤其適合于整合到臨床 PCR 檢測(cè)試劑盒中。

1. 回收率高，可以達(dá)到 90%以上，高于絕大部分基于離心柱的提取方法。

2. 靈敏度高，通過(guò) PCR 檢測(cè)到的終靈敏度可以達(dá)到 30-50 拷貝/mL。

3. 一管式操作，不使用離心柱，整個(gè)操作過(guò)程均在室溫下完成。

4. 安全無(wú)毒。

5. 處理量大，如果加上病毒離心富集步驟，多可以處理 1.5 mL 液體病毒樣品。

6. 與 PCR 和熒光 PCR 兼容。

7. 本產(chǎn)品只能用于科研，不能用于臨床。

常溫運(yùn)輸及保存，有效期一年。

1. 在 1.5 mL 螺旋蓋塑料離心管(不要使用壓蓋式塑料離心管)中加入 0.2 mL 液 體樣品（血清、血漿、尿液、腦脊液、唾液、眼淚等等）。

1.1、 如果是口腔拭子、咽喉拭子等各種拭子樣品，則將拭子放入 0.2mL 自備生理鹽水中擠壓出液體，然后取 0.2mL 進(jìn)行 DNA 提取。

1.2、 如果是糞便等半固定樣品，則取約 0.3mL 的樣品，加入 0,3 自備生理 鹽水，震蕩重懸，離心取 0.2mL 上清進(jìn)行 DNA 提取。

1.3、 如果血液，細(xì)胞培養(yǎng)液等含細(xì)胞的液體，可以離心用上清，也可以直 接取用，但后者提取的 DNA 中有細(xì)胞的基因組 DNA。

1.4、 如果樣品是實(shí)體組織或培養(yǎng)細(xì)胞，則需要在自備生理鹽水中勻漿后離 心，用 0.2mL 上清液（含病毒）進(jìn)行 DNA 提取，但此種情況下后 得到的 DNA 不可避免的會(huì)含有基因組 DNA。

1.5、 如果液體樣品中的病毒需要富集，可以使用 1.5 mL 上述方法得到的 液體在 4℃ 24,000 g 冷凍離心 60 分鐘, 移棄 1.3 mL、用剩下的 0.2mL 繼續(xù)操作。

2. 在 0.2mL 樣品中加入 0.6mL DNA 病毒裂解液，振蕩 30 秒混勻后室溫放置 10 分鐘。

3. 振蕩 30 秒混勻后加入 0.7 mL 自備的異丙醇，振蕩 30 秒混勻后，15,000 g 室溫離心 15 分鐘。

4. 移棄上清，注意不要觸及管底的 DNA 沉淀，加入 1.0 mL 70%乙醇，振蕩數(shù) 秒后 15,000 g 室溫離心 5 分鐘。

5. 移棄上清，注意不要觸及管底的 DNA 沉淀。再短暫離心數(shù)秒, 移棄殘留液體 （殘留的乙醇會(huì)影響后續(xù)反應(yīng)）。如果此時(shí)離心面的管壁上有可見(jiàn)的膜狀沉淀， 屬于正常現(xiàn)象（常見(jiàn)于血清血漿樣品）。加入 20uL 核酸樣品稀釋液，用移液 槍仔細(xì)吹打離心管管底和管壁的膜狀沉淀，使其溶解。溶解液混濁或有少量不 溶物是正?，F(xiàn)象。不要離心只取上清使用，因?yàn)椴蝗艹恋砦镏泻?DNA，必 須取混合液使用（哪怕很渾濁）。

6. 樣品可以直接取適量用于 PCR，也可保存于-20℃長(zhǎng)期保存。

病毒DNA提取試劑盒